微生物与手足口病

    2008年3~4月，安徽阜阳爆发了急性传染病手足口病的疫情。截至5月5日，发病例达4496例，已有20个儿童被夺去了生命。4月23日，经确诊此次手足口病的元凶是人类肠道病毒71型（Entreovirus 71， EV71）。
    手足口病是由肠道病毒引起的传染病，多发生于5岁以下儿童，可引起手、足、口腔等部位的疱疹，少数患儿可引起心肌炎、肺水肿、无菌性脑膜脑炎等并发症。个别重症患儿病情发展快，导致死亡。
本病于1957年在新西兰首次报道，并于1958年分离出该病的主要病原体之一——柯萨奇病毒。1959年提出“手足口病”命名。它是一种全球性传染病。我国各地都有发病报道，有些地区的流行率高达1000/10万。
    引起手足口病的病原体有20多中，除柯萨奇病毒A16外，EV71是其中最为常见的一种。
1995年武汉病毒研究所从手足口病人中分离出EV71病毒，1998年深圳市卫生防疫站从患者分离出2株EV71病毒。2000年5~8月山东省招远市小儿手足口病暴发，市人民医院接诊患儿1698例，其中男1025例，女673例，年龄最小5个月，最大14岁；3例合并暴发心肌炎死亡。
    分离EV71的常用方法是采用人上皮癌细胞（Hep-2）、人横纹肌癌细胞（RD）和绿猴肾细胞（Vero）等细胞系从患者粪便标本、咽拭子中扩增病毒。引起细胞病变的阳性分离株使用EV71特异性中和抗体进行中和鉴定，是鉴定病毒的“金标准”。血清中和抗体效价检测法可以用来测定患者血清中的中和效价，也可以通过酶联免疫吸附法检测患者血清中的EV71抗体。近年来，反转录-聚合酶链式反应用于EV71的检测，可以快速、准确地扩增粪便悬液中的病毒，鉴定病毒亚型，结果可靠。
    今年的这次疫情病毒EV71属于小RNA病毒科肠病毒属A型，与科萨奇病毒A16近缘。病毒颗粒呈20面体对称的球型结构，无包膜和突起直径为24~30nm，核酸为单股正链RNA，目前已知人类是EV71的唯一自然宿主。EV71比一般的肠病毒危害更大，因为它的急性感染还容易造成严重的神经系统，呼吸系统和循环系统并发症，甚至导致死亡！~~~
    EV71分为A、B、C 3个基因型，8个基因亚型（B1~B4和C1~C4亚型），基因亚型与分离地区和分离时间有一定关联。病毒颗粒的衣壳蛋白VP1具有显著的基因多态性，同时也是特异性中和表位所在的蛋白，直接影响病毒的抗原性。
 EV71引起的手足口病给人类健康带来巨大的威胁，许多科学工作者对EV71的分子流行病学、威胁和病理机制，以及抗EV71的药物和疫苗都进行了深入的研究。
 对临床标本如咽拭子和粪便标本中采用实时聚合酶链式反应进行检测和病毒分型，技术已经很成熟。Hsu等用PCR和DNA检序检测了台湾21株来源于临床或环境的EV71标本，进行多基因分析，发现自2004年来台湾环境和临床中的样本均属于2个亚型——3和4亚型。
 EV71的病理机制已得到广泛研究。Tung等发现EV71在大鼠血管平滑肌细胞中能够通过PDGF受体、MAPK等多途径诱导VCAM-1的表达，这种诱导作用呈明显的时间依赖性和病毒感染量依赖性，表明这可能是EV71感染致病的机制之一。Weng等发现，牛乳铁蛋白能够与EV71的VP1蛋白和宿主细胞均发生结合，而发挥体内、外抗EV71作用。
 抗EV71的疫苗和药物研究始终是EV71的研究热点。Lee等建立了一个基于哺乳动物细胞的反向杂交系统，对EV71的3C蛋白酶进行功能研究，该系统能够通过高通量筛选的方法发现抗EV71药物。Liu等发现无血清微载体细胞培养技术可以有效生产EV71灭活疫苗。Chen等制造了一种能够表达EV71结构蛋白VP1的转基因小鼠，其乳汁中含有表达的VP1蛋白。
 手足口病诊断标准
 人群对EV71感染引起的手足口病普遍易感，各年龄组均可发病，但学龄前儿童尤其是4岁及以下年龄组发病最高，占85%~95%。本病潜伏期为2~7d,一般病例症状为急性起病，发热；口腔粘膜出现散在疱疹，米粒大小，疼痛明显；手掌或脚掌部出现米粒大小疱疹，臀部或膝盖偶可受累。疱疹周围有炎性红晕，疱内液体较少。部分患儿可伴有咳嗽、流涕、食欲不振、恶心、呕吐、头疼等状。
 临床采用实验室检查和物理学检查结合患者临床表现来诊断手足口病，重症病例外周白细胞计数明显升高，血糖可升高。X光胸片可变纤维双肺纹理增多，网格状、点片状、大片状阴影，及部分病例以单侧为主，快速进展为双侧大片阴影。磁共振可发现脑干和脊髓灰质损伤，在临床诊断基础上，EV71核酸检测阳性，分离出EV71病毒或EV71 IgG抗体检测阳性，EV71 IgG抗体4倍以上增高或由阴性转为阳性，是确诊的依据。
    手足口病是怎样传播的?
　　1.接触病人皮肤。
　　2.通过被病毒污染的手、毛巾、手绢等物。
　　3.患者喉咙分泌物（飞沫)传播。
　　4.饮用污染的水。
    因此预防上主主要应做到：
    1．注意饮食卫生，避免病从口入；
    2．避免与患儿接触，幼托机构发现病人，要采取隔离措施；
    3．平时应加强体质锻炼；
    4．调理脾胃，及早治疗食积。
    5.做到“洗净手、喝开水、吃熟食、勤通风、晒衣被。” 
    结语：
    综上所述，EV71能够引起手足口病的广泛流行，在部分患者中导致重度症状和死亡，严重危害人类健康，且目前尚无特异性的预防疫苗、治疗方法和抗病毒药物，只能采取综合及支持疗法。对EV71感染引起严重的胸部、肺部并发症并导致患者死亡的机制也所知甚少。因此，尚需深入研究EV71的致病机制，尤其是EV71重症感染的机制，为开发针对EV71的疫苗、抗病毒药物和治疗方法提供依据。